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ER2566 感受态细胞
点击次数:161      发布时间:2019-04-17

ER2566 感受态细胞基因型:

F- λ- fhuA2[lonomplacZ::T7gene1 gal sulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm]

ER2566 感受态细胞简要说明:

 High5TM系列 ER2566感受态细胞为lon  ompT蛋白酶缺陷菌株。

膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。

 High5TM系列 ER2566感受态细胞采用特殊化学试剂制作,可用于DNA的化学转化,经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg

ER2566 感受态细胞操作说明:

1. 100μl冰上融化的ER2566感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

ER2566 感受态细胞注意事项:

1.  感受态细胞在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)

5. 为获得需要量的蛋白,诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

 

上海淳麦生物科技有限公司  感受态细胞培养专家  4006815880

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