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OrigamiB(DE3)感受态细胞
点击次数:105      发布时间:2019-10-03

 

OrigamiB(DE3)感受态细胞


OrigamiB(DE3) Chemically Competent Cell

产品编码:                        保存条件: -80℃   
产品规格:

OrigamiB(DE3)20×100μl
pUC19control vector10pg/μl         10μl

 

OrigamiB(DE3)感受态细胞基因型:

F-omphsdSB(rB-mB-gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR)

 

OrigamiB(DE3)感受态细胞简要说明:

 OrigamiB(DE3)感受态细胞包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase(trxB) 和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。 
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEXpMAL等质粒的蛋白表达,具有卡那霉素和四环素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性质粒的表达。
OrigamiB (DE3) 感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg
 
 

OrigamiB(DE3)感受态细胞操作说明:

  1.  100μl冰上融化的OrigamiB(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

  1.  将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

 

OrigamiB(DE3)感受态细胞注意事项:

  1.   感受态细胞在冰上融化。
  2.  混入质粒时应轻柔操作。
  3.  转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
  4.  诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
  5.  为获得需要量的蛋白,诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

6. 具有卡那霉素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性质粒的表达。

 

上海淳麦生物科技有限公司  感受态细胞培养专家  4006815880

OrigamiB(DE3)感受态细胞


OrigamiB(DE3) Chemically Competent Cell

产品编码:                        保存条件: -80℃   
产品规格:

OrigamiB(DE3)20×100μl
pUC19control vector10pg/μl         10μl

 

OrigamiB(DE3)感受态细胞基因型:

F-omphsdSB(rB-mB-gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR)

 

OrigamiB(DE3)感受态细胞简要说明:

 OrigamiB(DE3)感受态细胞包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase(trxB) 和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。 
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEXpMAL等质粒的蛋白表达,具有卡那霉素和四环素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性质粒的表达。
OrigamiB (DE3) 感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg
 
 

OrigamiB(DE3)感受态细胞操作说明:

  1.  100μl冰上融化的OrigamiB(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

  1.  将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

 

OrigamiB(DE3)感受态细胞注意事项:

  1.   感受态细胞在冰上融化。
  2.  混入质粒时应轻柔操作。
  3.  转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
  4.  诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
  5.  为获得需要量的蛋白,诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

6. 具有卡那霉素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性质粒的表达。

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