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JM110感受态细胞说明书
点击次数:49      发布时间:2019-10-07

JM110感受态细胞

JM110 Chemically Competent Cell
产品规格:

JM110 
pUC19control vector10pg/μl       10μl

JM110感受态细胞基因型:
rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIqlacZΔM15]
JM110感受态细胞简要说明:
CMbio JM110菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR) ;是甲基化基因damdcm 缺失的菌株,提取得到的质粒DNA,可被对damdcm甲基化敏感的内切酶切割; lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选,但转化效率不高,CMbio High5TM系列JM110感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19 质粒检测转化效率约107 cfu/μg。一般不用于质粒构建,只适用于质粒转化。
JM110感受态细胞操作说明:
1、CMbio JM110感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA并用手EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
242℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
JM110感受态细胞注意事项:

  1. CMbio  感受态细胞在冰上融化。
  2.  混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

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